在科研和细胞工程等领域中构建稳定表达细胞株，经常需要实现多个基因的稳定共表达，目前常用的策略是多重感染、多重分离筛选等，然而这种方式存在很多弊端：①真核细胞中可使用的筛选标记数量有限；②实验周期长；③同时使用多个不同的筛选基因可能对细胞产生不利影响；④多基因串联，病毒包装效率低等；以上问题为筛选多基因共表达的稳转株在时间和成本等方面提出了挑战。因此，有必要开发新的技术手段解决以上问题。
维真生物建立了一种可简单快速地实现多基因共表达的分裂筛选系统！
目前，我们已经利用上述系统，成功获得了共表达四种转录因子（Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4）的IPS稳转细胞系。 如上图所示，我们将四种转录因子构建到两个慢病毒载体中并包装成慢病毒。随后将两个质粒与慢病毒分别转导或者共转293A细胞，Puro筛选后，我们发现没有“摄取”到载体和只“摄取”到一种载体的细胞大量死亡，而“摄取”到双载体的细胞存活率较高。并且，双载体“摄取”组细胞四种转录因子的表达水平均有显著增加。这说明，大量的双慢病毒载体成功进入同一细胞，表达了完整的抗生素蛋白，且四种转录因子均实现了过表达。 （点击可看大图） 图2. 质粒转染后结果 图3. 慢病毒感染后结果 结语：
